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もしヒト由来のガン遺伝子を運んでいるバクテリオファーがあれば、そのＤＮＡの中にもアルウ配列が見つかるはずだと考えられた
そこで、ある特定の塩基配列をもっているＤＮＡを検出するには、その結果、トランスフオーメーションが起こることが確認された
つまり、最終的に得られたこのバクテリオファージのＤＮＡの中にはガン遺伝子が含まれていたのである
こうして、ついに、膀胱ガンのT24細胞からガン遺伝子がクローニングされたのだ
ガン細胞から研究者の手中に初めて取り出されたガン遺伝子について、そのＤＮＡがどんな構造をもつか調べられた
ヒトのガン細胞から初めてクローニングされたこのガン遺伝子は、一体、どんな遺伝子なのかという疑問が起こる
その当時、ガンウイルスではさまざまなガン遺伝子が見つけられていたので、まず、そのいずれかと似ていないかどうか調べられた
遺伝子ＤＮＡが同じものか、似たものか、あるいは、似ているとすればどの部分が似ているかを調べる実験方法は、一九七五年にアメリカの研究者E.Sによって開発され、「ブロットハイブリダイゼーション法」と呼ばれている
遺伝子の分析にはなくてはならない重要な研究方法である
ＤＮＡの二重らせん分子の二つの鎖の間の結合は、あい対する塩基の間の水素結合によって保たれている
グアニン（Ｇ）とシトシン（ｃ）が三本の、アデュン（Ａ）とチミン（Ｔ）は二本の水素結合で結ばれ、ファスナーのように閉じられている
この水素結合は比較的弱いので、温度を100度近くまで上げたり、戸一0以上のアルカリ性狐すると
水素結合がはずれて二本鎖ＤＮＡ分子はほどけて一本鎖に分かれてしまう
逆に、温度をゆっくりと下げていくと、水素結合が再びできて、一本鎖に分かれていたＤＮＡは二本鎖分子に戻る
遺伝子の情報は四種の塩基の並び方で決められている
だから、二つの遺伝子がよく似ているということは、塩基の並び方が似ているということである
調べようとする二種類のＤＮＡ試料を混ぜてから温度を上げて一本鎖にほどき、ついで、ゆっくりと温度を下げてみる
もし、二種類のＤＮＡ分子の塩基配列が似た部分をもっている場合、二本鎖に戻るときに異なったＤＮＡ分子の鎖の間で水素結合ができ、「合いの子（ハイブリッド）」の二本鎖ＤＮＡができる
ハイブリッドの二本鎖ができたかどうか調べれば、この二種類のＤＮＡ分子は塩基配列がよく似ているかどうか、つまり、お互いによく似た遺伝子であるかどうかがわかる
こうした実験方法を「ハイブリッド」、つまり、「ハイブリダイゼーション法」という
ＤＮＡ分子はマイナスの電気を帯びているので、プラス電極の方へ引っ張られる
ただ、寒天の中なのでＤＮＡのような大きな分子は動きにくく、小さく切断されたＤＮＡ分子ほど速く動き、分子の大きさによって分かれる
この操作は「電気泳動法」と呼ばれる
「ブロット」とはインクの「しみ」のことであるが、Ｘ線フィルムのスポットがインクをたらした「しみ」によく似ているため、この実験はブロットハイブリダイゼーション法と呼ばれている
すでに得られていたウイルスのさまざまなガン遺伝子と、T24細胞から新しくクローニングされた細胞のガン遺伝子との間で、ブロットハイブリダイゼーション実験が行われた
その結果、驚くべきことに、T24のガン遺伝子はウイルスの「ラス遺伝子」と非常によく似たものであることが明らかにされた
ラス遺伝子は、発見者の名前から命名されたガンウイルス、ハービー肉腫ウイルスが運んでいるガン遺伝子である
ラットからこのウイルスが見つかり、ヒトのガンはガンウイルスで起こるものではないという考え方で研究をスタートしたにもかかわらず、膀胱ガンのガン遺伝子は、皮肉にも、ウイルスのガン遺伝子と非常によく似ていることがわかったのである
もちろん研究の筋道としては、T24細胞のＤＮＡがＮＩＨ／３Ｔ３細胞にトランスフォーメーションを起こすことがわかった時点で、どうも、T24細胞からラス遺伝子が移入されているらしいという予想はつけられていた
それは、トランスフォーメーションを起こしたＮＩＨ／３Ｔ３細胞のＤＮＡの中に、もとのＮＩＨ／３Ｔ３細胞には入っていなかった、ラス遺伝子とそっくりな新しい遺伝子が、ブロットハイブリダイゼーション実験で見つかっていたからである
こうしてガン遺伝子が実際にクローニングされると、ヒト膀胱ガンのT24細胞のガン遺伝子はラス遺伝子とよく似た遺伝子であるということが明白な事実になって研究者の前に突きつけられたのである
正常な細胞にもガン遺伝子があるウイルスのガン遺伝子が得られると、それは一体どこから由来したのだろうかという疑問がだされた
この問いに対して、W大学の洞察力の鋭いノーベル賞学者、H.Tが、一九七四年に、ガンウイルスの起源に関する興味深い仮説を提唱していた
ウイルスのガン遺伝子は、その原形が細胞の遺伝子として存在していて、それがガンをひき起こす働きをもつように変化するとともに、ウイルスの遺伝子の中に取り込まれたものである
Sたちは、早速、この仮説の真偽を確かめる実験を企てた
彼らは、取り出したラウス肉腫ウイルスのガン遺伝子と正常細胞のＤＮＡとの間のハイブリダイゼーシ曰ン実験を行ったのである
その結果、このウイルスの宿主であるニワトリはもとより、マウスやヒトに至るさまざまな動物の正常細胞の中に、このウイルスのガン遺伝子とよく似た遺伝子が存在することが明らかにされたのである
つまりテミンが提唱したように、ウイルスのガン遺伝子の原形は正常な細胞の染色体の中にあったのだ
現在では、ウイルスのガン遺伝子は20種類にものぼり、それぞれのガン遺伝子に対応して原形となっている遺伝子が正常細胞に見つかっていて、組換えＤＮＡ実験を使ってクローニンラス遺伝子についても、ウイルスのラス遺伝子とよく似た遺伝子、「原形ラス遺伝子」がすでに正常細胞から取り出されていた
ここに至って、ガン遺伝子として、ウイルス、ガン細胞、そして正常細胞のそれぞれから得られた三種類のラス遺伝子があることになる
このうち、ウイルスとガン細胞から得られたラス遺伝子は、ＮＩＨ／３Ｔ３細胞に移入すると、トランスフォーメーションが起こることはいうまでもない
しかし正常細胞の原形ラス遺伝子はトランスフォーメーションを起こす働きをもっていなかったのである
正常細胞にある原形ガン遺伝子は「その塩基配列がウイルスのガン遺伝子とよく似ている」という点ははっきりしているが、その他のこと、たとえば、正常細胞の中でどのような働きや役割をもっているかなど、この遺伝子の大切な性質はまったく謎のままに残されていた
果たして、前に考えたように、正常細胞の原形ラス遺伝子が変化－突然変異－してガン細胞のラス遺伝子になったのであろうか？それは、どのような突然変異なのだろうか？膀胱ガンから得られたラス遺伝子はトランスフォーメーションを起こすが、正常細胞の原形ラス遺伝子はトフンスフォーメーションを起こす働きをもっていない
一体、この違いは遺伝子の上でどこにあるのだろうか？ここに
細胞ガン化の謎が秘められていると考えられた

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